本文作者:交换机

乳胶标记抗体,乳胶标记抗体方法

交换机 03-27 34
乳胶标记抗体,乳胶标记抗体方法摘要: 大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于乳胶标记抗体的问题,于是小编就整理了5个相关介绍乳胶标记抗体的解答,让我们一起看看吧。胶体金标记技术原理?hiv乳胶法是什么检验...

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于乳胶标记抗体的问题,于是小编就整理了5个相关介绍乳胶标记抗体的解答,让我们一起看看吧。

  1. 胶体金标记技术原理?
  2. hiv乳胶法是什么检验方法?
  3. 乳胶法45天检查艾滋病抗体阴性能排除吗?
  4. 乳胶法45天检查艾滋病抗体阴性能排除吗?
  5. 单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义?

胶体金标记技术原理?

胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。

由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。

乳胶标记抗体,乳胶标记抗体方法
(图片来源网络,侵删)

现已广泛应用于电镜、流式细胞仪、免疫印迹、蛋白染色、体外诊断试剂的制造等领域。

hiv乳胶法是什么检验方法?

        HIV乳胶法一般是指HIV抗体乳胶法,为即时检测,属于快速检测试验,等同于第三代酶联免疫吸附试验,但灵敏度较差。HIV初筛试验通常检测HIV抗体或HIV抗原抗体,其中酶联免疫吸附试验根据检测标准等同为四代。

       目前常用的HIV检测有三代和四代,三代检测HIV抗体,四代在三代基础之上检测抗原,即抗原抗体联合检测。HIV抗体乳胶法也就是快速检测,与酶联免疫吸附试验原理类似,较多患者也使用三代、四代等进行区别,HIV抗体检测为三代,抗原抗体联合检测为四代,因此HIV抗体金标法、HIV抗体乳胶法等均无抗原抗体联合检测,都属于三代。

乳胶标记抗体,乳胶标记抗体方法
(图片来源网络,侵删)

乳胶法45天检查艾滋病抗体阴性能排除吗?

现在所说的是艾滋病抗体筛查技术选择快速检测的方式,一般窗口期是在一个月,现在45天检测的结果阴性,基本可以排除感染,当然在中国最好还是推荐在两个月三个月分别检测,只有这两次的结果也是阴性,那么就可以基本肯定排除艾滋病的感染。

乳胶法45天检查艾滋病抗体阴性能排除吗?

现在所说的是艾滋病抗体筛查技术选择快速检测的方式,一般窗口期是在一个月,现在45天检测的结果阴性,基本可以排除感染,当然在中国最好还是推荐在两个月三个月分别检测,只有这两次的结果也是阴性,那么就可以基本肯定排除艾滋病的感染。

单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义?

单克隆抗体制备的基本原理与过程如下:

乳胶标记抗体,乳胶标记抗体方法
(图片来源网络,侵删)

B淋巴细胞在抗原的***下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,再进一步克隆化,这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力,又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力,将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。

1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多***用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可***用脾内直接免疫法。

2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-***的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养,融合前24h换液一次,使骨髓瘤细胞处于对数生长期。

3)细胞融合的关键:

1技术上的误差常常导致融合的失败。例如,供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。

2融合试验最大的失败原因是污染,融合成功的关键是提供一个干净的环境,以及适宜的无菌操作技术。

4)阳性克隆的筛选 应尽早进行。通常在融合后10天作第一次检测,过早容易出现***阳性。检测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质,以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫荧光法等。其中ELISA法最简便,RIA法最准确。阳性克隆的筛选应进行多次,均阳性时才确定为阳性克隆进行扩增。

5)克隆化 克隆化的目的是为了获得单一细胞系的群体。克隆化应尽早进行并反复筛选。这是因为初期的杂交瘤细胞是不稳定的,有丢失染色体的倾向。反复克隆化后可获得稳定的杂交瘤细胞株。克隆化的方法很多,而最常用的是有限稀释法。

到此,以上就是小编对于乳胶标记抗体的问题就介绍到这了,希望介绍关于乳胶标记抗体的5点解答对大家有用。

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