本文作者:交换机

抗原抗体杂交技术,抗原抗体杂交技术的原理

交换机 01-25 22
抗原抗体杂交技术,抗原抗体杂交技术的原理摘要: 大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于抗原抗体杂交技术的问题,于是小编就整理了2个相关介绍抗原抗体杂交技术的解答,让我们一起看看吧。分子检验三种方法?农杆菌转化法?分...

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于抗原抗体杂交技术问题,于是小编就整理了2个相关介绍抗原抗体杂交技术的解答,让我们一起看看吧。

  1. 分子检验三种方法?
  2. 农杆菌转化法?

分子检验三种方法

可以用于骨肿瘤研究的分子检测技术包括:

(1)聚合酶链反应(PCR)技术:可以检测基因的异常。包括肿瘤基因及肿瘤抑制基因的异常。

抗原抗体杂交技术,抗原抗体杂交技术的原理
(图片来源网络,侵删)

(2)反转录PCR(RT-PCR)技术:确定mRNA的转录情况。是检测融合性基因的主要方法。

(3)荧光或显色原位杂交(FSH或CISH)技术:通过染色体特异性的DNA片段(探针)来检测染色体的易位基因的放大,基因的重排以及肿瘤抑制基因的丢失等。

1、检测转基因生物的染色体DNA上是否插入目的基因,用DNA分子杂交技术!

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2、检测目的基因是否转录出mRNA,用分子杂交技术

3、检测目的基因是否翻译出蛋白质,用抗原抗体杂交技术

杆菌转化法?

转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上——进入农杆菌——导入植物细胞——目的基因整合到植物染色体的DNA上——目的基因得以稳定维持和表达

抗原抗体杂交技术,抗原抗体杂交技术的原理
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1、获取目的基因:用限制性核酸内切酶切割下目的基因。

2、基因表达载体的构建:将目的基因与载体(大多数选用质粒)用DNA连接酶连接起来。

3、将目的基因导入受体细胞:将含目的基因的重组质粒导入农杆菌(农杆菌为受体细胞)。

4、目的基因的检测与鉴定:用DNA分子杂交技术/分子杂交技术/抗原-抗体杂交/个体生物学水平鉴定(这个方法需要导入重组后的细胞的植物体,详见第五步) 几种方法进行检验(根据要求选取不同方法)。

5、最后将成功表达的细胞导入植物体内,对植物体进行个体生物学水平鉴定。

整个转基因体系的建立步骤大致可以归纳为:目的载体的构建---载体的农杆菌转化---农杆菌与植株培养---转化植株的筛选---转化植株的鉴定。

在每一步中都涉及到很多的方法与技术。目的载体的构建,包括目的基因的克隆、载体的酶切、连接(用限制性核酸内切酶与DNA连接酶),以及测序分析。载体的农杆菌转化,目前有很成熟的方法,试验中应注意热激和冷激的时间。农杆菌与植株的共培养,即为植株转化实验,在溶液中加入促进植株愈伤生长的激素能一定程度提高转化率。转化植株的筛选,大多是利用抗生素进行筛选的,抗生素的选择则需根据目的载体确定,设置不同梯度的抗生素对植株进行筛选。转化植株的鉴定,一般***用PCR法。以上所有的操作,都应该在无菌环境下进行,无菌是植物组培的一项基本,但是重要的要素。

到此,以上就是小编对于抗原抗体杂交技术的问题就介绍到这了,希望介绍关于抗原抗体杂交技术的2点解答对大家有用。

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