溶解抗体-溶解抗体用缓冲液

摘要： 本篇文章给大家谈谈溶解抗体，以及溶解抗体用缓冲液对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。本文目录一览：1、免疫组化抗体用什么稀释剂?2、...

本篇文章给大家谈谈溶解抗体，以及溶解抗体用缓冲液对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。

本文目录一览：

• 1、免疫组化抗体用什么稀释剂?
• 2、从腹水中纯化的抗体不溶解怎么办
• 3、抗体可以直接溶解细菌吗
• 4、将抗体溶于NaCl溶液中是否会造成其生物活性丧失?

免疫组化抗体用什么稀释剂?

1、建议用血清稀释，最理想的方法是用二抗同种属的血清，如二抗是山羊的，用山羊血清，或者是用2%BSA，前提是一抗不是牛的。也就是说，一抗是羊的，小鼠的，兔子的，都可以用BSA。

2、IHC 一抗稀释比例可以参考说明书，抗体稀释液的成分都大同小异，主要就是BSA+PBS/TBS，所以一般的抗体稀释液就能用了。

3、抗体稀释剂通常由 磷酸缓冲液为主体，加牛血清白蛋白（0.5～1%）作为蛋白稳定剂（因为抗体稀释后在低浓度下容易失活）， 另外还需要加叠氮钠（0.05%～0.1%）或硫柳汞（0.05%）作为防腐剂（保存剂）。

4、PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释，再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了，用培养液没什么意义，只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。

从腹水中纯化的抗体不溶解怎么办

第二次加强注射：如果ELISA得到阳性的结果，用弗氏不完全佐剂乳化抗原，再次注射小鼠，并在注射后的2～3天后注射H22腹水瘤细胞，每次注射量再5×106~0×106个细胞，7天后产生腹水。

小鼠腹水抗体纯化后沉淀是以下原因：抗体纯化不完全：在抗体纯化的过程中，如果未能完全去除杂质，可能会导致沉淀的产生。抗体变性：抗体在纯化过程中可能会受到某些因素的影响，导致其变性，从而产生沉淀。

过滤出来！滤渣用相同溶剂再溶。如果能溶，那就是溶解速度慢，不溶就肯定是杂质。

从成分的角度分析， 抗体分子是一类蛋白质分子，与其他蛋白质一样，它有一定的等电点、溶解度、荷电性及疏水性，可以用电泳、 盐析沉淀或其他层析技术进行分离、 纯化。

抗体可以直接溶解细菌吗

1、抗体其实只能和特定的抗原结合，结合后形成的叫做抗原-抗体复合物，会被吞噬细胞吞掉，所以不能说抗体直接杀死病菌。

2、抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。

3、不是，抗体可以与抗原表面的分子片断结合，形成复合物，该复合物抗体部分可以被T细胞、巨噬细胞识别，然后由他们让细胞凋亡，或是吞噬抗原。

4、伤寒杆菌等发挥作用。但这种作用往往并不彻底，仅使杆菌菌体膨大或变为球形，不引起溶解。但若于试验中系统中加入适量的溶菌酶，则可出现溶菌现象。

5、最后不能消化的菌体残渣，将被排到吞噬细胞外。细菌被吞噬在吞噬细胞内形成吞噬体；溶酶体与吞噬体融合成吞噬溶酶体；溶酶体中多种杀菌物质和水解酶将细菌杀死并消化；菌体残渣被排出细胞外。

将抗体溶于NaCl溶液中是否会造成其生物活性丧失?

1、会抑制活性。口水医学上也叫做唾液，是无色透明有泡沫稍浑浊的液体，唾液分泌量与尿量相似，酶促反应中，如氯化钠达到约 30%浓度时可抑制唾液淀粉酶的活性。

2、蛋白质溶于氯化钠溶液还有活性。向蛋白质溶液中加入NaCl（无机盐溶液）后，可以使蛋白质凝聚而从溶液中析出，这种作用叫作盐析，盐析并不会改变物质本身的化学性质。

3、植物酶的最适温度为50－60℃。酶对温度的稳定性与其存在形式有关，有些酶的干燥剂，虽加热到100℃，其活性并无明显改变，但在100℃的溶液中却很快的完全失去活性。低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。

4、这样就会使得蛋白质的理化性质以及生物活性改变或丧失。关于变性是否可逆，要看影响蛋白质的理化因素是否强烈。

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