抗体的配法-抗体配对怎么做

摘要： 本篇文章给大家谈谈抗体的配法，以及抗体配对怎么做对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。本文目录一览：1、WB一抗用什么稀释2、...

本篇文章给大家谈谈抗体的配法，以及抗体配对怎么做对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。

本文目录一览：

• 1、WB一抗用什么稀释
• 2、人工制备抗体制备方法有哪些?
• 3、抗体的制备有哪些?
• 4、免疫组化中,一抗、二抗的制备方法?原理?
• 5、决定抗原抗体最佳配比的方法有几种?
• 6、求助做夹心ELISA时,夹心抗体的选择

WB一抗用什么稀释

1、作涂料稀释剂（例如甲苯、香蕉水、松香水、松节油），作洗甲水或去除胶水（例如丙酮，醋酸甲酯，醋酸乙酯），除锈（例如己烷），作洗洁精（柠檬精），用于香水（酒精）跟用于化学合成。

2、试剂公司有一抗和二抗稀释液买，这个比较好，可以反复用几次（用完4度保存）。我们做的时候（其它一些人也是这样），有时用TBST，效果也可以。

3、wb抗体用5%的脱脂奶粉（1‰TBST溶液）或者1%的BSA（1‰TBST溶液）配置，可以先让抗体与奶粉或BSA蛋白非特异结合，就不会与PVDF膜上的蛋白结合了。

人工制备抗体制备方法有哪些?

1、多克隆抗体的制备。①免疫方法：对多克隆抗体，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。

2、***用基因敲出技术将动物抗体基因敲除，造成动物抗体基因缺失，将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术，移至抗体基因缺失动物中，通过动物表达人类抗体，达到抗体完全人源化。

3、制备兔源多克隆抗体的主要步骤包括： 准备完全抗原。 对兔子进行免疫。 进行效价检测和终放。 进行抗体亲和纯化。 对抗体进行浓缩和保存。在免疫过程中，需要选择合适的佐剂和抗原，以产生良好的免疫反应。

4、抗体制备 凝胶过滤法：该方法利用分子量差异来纯化目标抗体。在凝胶层中，抗体样品会因为其分子量的不同而进一步分离。通常选择分子量大小、孔径等参数适当的凝胶过滤柱，通过洗涤，可以高效地将目标抗体进行纯化和提纯。

5、用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原表位的特异性抗体，即单克隆抗体。单克隆抗体是人工制备的杂交瘤细胞生产的，杂交瘤细胞是由一个经抗原激活后的B细胞与一个骨髓瘤细胞融合形成。

6、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤：制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试，看看是否成功免疫。如果成功免疫，杀死实验动物，采集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。

抗体的制备有哪些?

抗体制备、动物免疫、抗体纯化 多抗的基本条件 免疫原的制备 颗粒性抗原：细胞、病毒、细菌等，一般具有较强的免疫原性，可以不加佐剂，直接进行腹腔注射。

多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤：制备抗原。选择实验动物。动物免疫。试取血进行测试，看看是否成功免疫。如果成功免疫，杀死实验动物，***集全部血清。纯化出抗体。鉴定抗体。

单克隆抗体的大量制备主要***用动物体内诱生法和体外培养法。（1）体内诱生法 取BALB/c小鼠，首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。

免疫组化中,一抗、二抗的制备方法?原理?

1、方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法： 包被：用0.05M PH牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。

2、免疫组化原理 免疫组化染色是用一抗与被检测组织中目的蛋白抗原结合，然后用HRP等标记的二抗与一抗进行结合，最后通过与DAB显色剂反应，进而确认所要检测蛋白抗原的定位、半定量等目的。

3、WB一抗二抗是乙肝病毒感染的免疫学检测方法。WB是Western Blotting的缩写，即蛋白印迹技术，可以检测人体内是否存在抗乙肝病毒的抗体。一抗是指检测乙肝表面抗原（HBsAg）的抗体，二抗是指检测乙肝表面抗体（HBsAb）的抗体。

4、孵育一抗后，加入二抗，再经过一步冲洗，加入链霉亲和素过氧化物酶藕联物。

5、平常说的 免疫组化 就是用石蜡切片做的免疫组织化学，样品是经过甲醇或甲醛固定后脱水包埋得到的组织切片。加入一抗二抗，经DAB底物显色，用普通的显微镜观察信号分布和强度。

决定抗原抗体最佳配比的方法有几种?

【答案】：A 絮状沉淀试验受抗原抗体比例影响很大，可作为抗原抗体比例研究。

用琼脂双扩散能简便直观地反映不同抗原与同一抗血清，或不同抗血清与同一抗原的交叉反应。 原理1：单克隆抗体（MAb）与抗血清（又称多克隆抗体，PAb）最主要的区别是MAb为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。

①免疫方法：对多克隆抗体，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。

增加温度可增加分子间的热动能，加速已结合的复合物的解离，但由于温度变化易致蛋白变性，所以实际工作中极少应用。改变ph和离子强度是最常用的促解离方法，免疫技术中的亲和[_a***_]就是以此为根据纯化抗原或抗体。

正确答案：E 解析：1 .最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度比或量比，称为抗原抗体反应的最适比，也称为等价点 。2 .抗原抗体反应时，抗原抗体比例不合适不出现可见反应称为带现象 。

求助做夹心ELISA时,夹心抗体的选择

1、我也问过这个问题。听别人给我解释，说可以直接标记在一抗上然后加底物显色，但是那样的话，放大效果没有加二抗的好。

2、选择强阳性参考血清的A值为0.8左右、阴性参考血清的A值小于0.1的包被抗的的稀释度作为工作浓度。

3、①板孔的选择：ELISA级别的微孔板。②抗体选择：选择支持ELISA实验的抗体，根据推荐浓度稀释或摸索最适浓度。③包被缓冲液：pH6碳酸盐缓冲液或pH2磷酸盐缓冲液。④包被温度：2-8 ℃过夜包被或室温（37℃）包被2h。

4、用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型： 1 双抗体夹心法测抗原 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：1） 将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2） 加受检标本，保温反应。

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