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血清制作抗体-血清抗体检测原理

交换机 01-28 53
血清制作抗体-血清抗体检测原理摘要: 本篇文章给大家谈谈血清制作抗体,以及血清抗体检测原理对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。本文目录一览:1、制备单克隆抗体的过程2、...

本篇文章给大家谈谈血清制作抗体,以及血清抗体检测原理对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。

本文目录一览:

制备单克隆抗体的过程

进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔,将来从腹水中提取。

一)脾细胞 1.材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2)1640培养液 单克隆抗体制备流程 (3)5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。

血清制作抗体-血清抗体检测原理
(图片来源网络,侵删)

过程 1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多***用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可***用脾内直接免疫法。

杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化:在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常***用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。

制备单克隆抗体用什么血清?

1、首次克隆化用CD-20-HT培养液:胎牛血清(20%),DMEM(80%),PS(1%),Hepes(0.5%),HT(1%),NaHCO3调pH值至2。

血清制作抗体-血清抗体检测原理
(图片来源网络,侵删)

2、进口的,主要是GIBCO的,具体哪一种,你要咨询一下业务员,尽量不要用国产的。

3、免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多***用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可***用脾内直接免疫法。

4、单克隆抗体(MAb)与抗血清(又称多克隆抗体,PAb)最主要的区别是MAb为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B细胞克隆的标志,是一种独特型的抗体,它的特异性是针对一个抗原决定簇的。

血清制作抗体-血清抗体检测原理
(图片来源网络,侵删)

5、制备抗独特型抗体有两种途径:即用传统免疫血清制备法和单克隆抗体制备法。

6、一)脾细胞 1.材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2)1640培养液 单克隆抗体制备流程 (3)5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。

人工制备抗体制备方法有哪些?

多克隆抗体的制备。①免疫方法:对多克隆抗体,免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。

***用基因敲出技术将动物抗体基因敲除,造成动物抗体基因缺失,将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术,移至抗体基因缺失动物中,通过动物表达人类抗体,达到抗体完全人源化。

制备兔源多克隆抗体的主要步骤包括: 准备完全抗原。 对兔子进行免疫。 进行效价检测和终放。 进行抗体亲和纯化。 对抗体进行浓缩和保存。在免疫过程中,需要选择合适的佐剂和抗原,以产生良好的免疫反应。

抗体制备 凝胶过滤法:该方法利用分子量差异来纯化目标抗体。在凝胶层中,抗体样品会因为其分子量的不同而进一步分离。通常选择分子量大小、孔径等参数适当的凝胶过滤柱,通过洗涤,可以高效地将目标抗体进行纯化和提纯。

用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体,即单克隆抗体。单克隆抗体是人工制备的杂交瘤细胞生产的,杂交瘤细胞是由一个经抗原激活后的B细胞与一个骨髓瘤细胞融合形成。

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