内参抗体选择,内参抗体如何选择

摘要： 大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于内参抗体选择的问题，于是小编就整理了3个相关介绍内参抗体选择的解答，让我们一起看看吧。Western Blot为什么必须要用内参...

大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于内参抗体选择的问题，于是小编就整理了3个相关介绍内参抗体选择的解答，让我们一起看看吧。

1. Western Blot为什么必须要用内参？
2. 为什么现在不利用杂交瘤细胞量产抗体呢？
3. 狗狗有哪些物质不可或缺？

Western Blot为什么必须要用内参？

在 Western Blot 中使用内参其实就是在 WB 过程中另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。

此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个 Western Blot 显色或者发光体系是否正常。

常用的蛋白质内参有 GAPDH 和细胞骨架蛋白 beta-actin 或 beta-tubulin。 一般要选择一个在处理因素作用的条件下蛋白含量不会发生改变的蛋白作内参。——厚百 Western Blot试剂以下是常见的内参：

内参名称 分子量大小 适用范围Beta-actin 43 kDa 胞浆和全细胞GAPDH 30-40 kDa 胞浆和全细胞Tubulin 55 kDa 胞浆和全细胞VCDA1/Porin 31 kDa 线粒体COXIV 16 kDa 线粒体Lamin B1 66 kDa 细胞核TBP 38 kDa 细胞核

为什么现在不利用杂交瘤细胞量产抗体呢？

看来你不是生物医学相关人士，事实是，我们一直都在利用杂交瘤技术生产抗体！

抗体在生物医学研究中具有重要作用，是鉴定蛋白质及其表达情况的重要试剂。常用的抗体比如内参抗体，以及常见的信号通路检测指标蛋白抗体，基本都是杂交瘤细胞产生的。杂交瘤细胞产生抗体的速度快，并且持续时间长，易于保存。

杂交瘤细胞产生抗体的过程是这样的:首先，纯化目的蛋白，最常见的方法就是利用微生物转入含有目的蛋白基因的质粒，生产出目的蛋白。然后将目的蛋白通过标签纯化，然后打入兔子或者老鼠体内，作为抗原，***动物产生抗体。

通过反复注射抗原***动物，产生更多的抗体。当达到一定程度后，分离纯化出可以产生抗体的免疫细胞，筛选出效率高的细胞后，与骨髓瘤细胞进行融合。然后筛选出所需的融合细胞，即杂交瘤细胞。

杂交瘤细胞扩大培养后，注射到动物腹腔中，这些细胞就会在动物腹腔中生长，并分泌抗体。取出腹水，然后就可以纯化出所需的抗体。验证合格后就可以用于科研检测，比如WB、IP、IF和ELISA等。

杂交瘤细胞生产抗体的技术一直在使用。只是应用范围基本都在生物医学研究上，大部分人不会接触到，所以不知道而已。

狗狗有哪些物质不可或缺？

应该为狗狗选择什么样的玩具

每个狗狗都有自己的性格特点，也都有不同的心情。它们心情不好也需要释放，也需要缓解自己的压力，这时玩具就能给它们带来惊喜与快乐。所以主人们可以经常给准备一些玩具，赶走它们生活中的寂寞与孤单。

耐咬又安全

狗狗一般很爱咬东西，如果玩具上有松散的细线、橡皮筋、缎带或像玩偶眼睛之类的细小零件，都有可能会给狗狗造成危险。因为它的尖牙能轻易地将这些物品咬下，大一点的零件也许会卡住它的喉咙，容易造成窒息；小一点的零件如果不小心被狗狗吞进肚子里，会对它的肠胃造成严重的损害。

配合狗狗体型

配合体型大小来挑选玩具的大小，特别是当狗狗还小的时候。不知道物品是否可吃的情况下，切记不要让狗狗不小心误食！

玩具的“定义”

很多饲主们以为家中报废的鞋子、袜子等，可作为狗狗的玩具，其实这是一个错误的观念。因为狗狗一旦习惯了玩具的形态，它就认定那种物品是可以拿来以供玩耍的。可是狗狗不会分别物品的新旧，如果某天发现您的新鞋变成了狗狗口中的玩具，这可不全是它的错哦！

辨识可玩的玩具

将狗狗经常乱咬的各种物品散落在地上，其中需要包括一件狗狗的玩具。

到此，以上就是小编对于内参抗体选择的问题就介绍到这了，希望介绍关于内参抗体选择的3点解答对大家有用。