抗体纯度怎么测-抗体纯度测定常用方法

摘要： 今天给各位分享抗体纯度怎么测的知识，其中也会对抗体纯度测定常用方法进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！本文目录一览：1、抗体的化学成分有什么检测...

今天给各位分享抗体纯度怎么测的知识，其中也会对抗体纯度测定常用方法进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！

本文目录一览：

• 1、抗体的化学成分有什么检测
• 2、如何测血清中的抗体浓度
• 3、测抗体纯度的是sdspage和双扩吗
• 4、抗体的纯度鉴定选择何种物质作为凝胶电泳支持物

抗体的化学成分有什么检测

1、目前常用的抗体检测方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫测定（RIA）、免疫荧光抗体试验、免疫印迹和流式细胞术等。其中酶联免疫吸附试验是最常用的方法之一，具有灵敏度高、操作简单、快速等优点。

2、抗核抗体检测 抗核抗体是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称，主要是IgG，其次是IgM和IgA，无器官和种属特异性。ANA在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性，正常老年人也可有低滴度的ANA。

3、借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种现象，对样品中的抗原或抗体进行定性、定量、定位的检测。 抗原与抗体的亲和力（affinity）抗原抗体的结合就像酶与底物的结合，激素与其受体的结合一样不是化学的反应，而是非共价键的可逆的结合。

如何测血清中的抗体浓度

抗血清的效价，就是指血清中所含抗体的浓度或含量。效价测定的方法常用的是放射免疫法，此法对所有的抗体均适用。某些由大分子（如蛋白类）抗原所产生的抗体，可用双扩散等方法测定。前者测定的效价极为精确。

购买已知浓度的抗体标准品，经过梯度稀释，然后测标准品的OD值。算出线性关系公式，将你的样品OD值代入公式，算出样品浓度。

在流感病毒微量中和实验中，酶结合物（HRP标记的羊抗鼠IgG抗体）与存在于MDCK细胞膜上的病毒***白抗原-***白单克隆抗体复合物结合，HRP酶催化OPD，使无色底物形成橙***化合物，再由ELISA检测仪测定吸光度值，从而获得中和抗体滴度[11]。

选择强阳性参考血清的A值为0.8左右、阴性参考血清的A值小于0.1的包被抗的的稀释度作为工作浓度。

我们目前***用的几种检测方式，也就从这些物质（以及它们的相关物质）脱胎而来，分别为针对遗传物质的核酸检测，针对包膜的抗原检测，以及针对抗体的血清抗体检测。

如果有条件用SPR方法，这是目前国际上流行的方法，该方法灵敏，客观。另外测亲和力之前最好先测定抗体的有效浓度，方法是夹心法，用标准免疫球蛋白做标准品。

测抗体纯度的是sdsp***e和双扩吗

SDSP***E检测抗体纯度应该是重链和轻链分离开两条带，NativeP***E则不会分离重链轻链，检测结果应该是一条带。

【答案】：E 制备亲和层析柱选择琼脂糖珠4B；聚乙二醇是增浊剂；琼脂糖是双向免疫扩散试验中常用的支持物；常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行抗体纯度的鉴定。

用于分析溶液中抗原和抗体的纯度，分析不同物质相互间扩原性的关系。是一种免疫扩散技术，借凝胶分隔开的两种反应剂（如抗原和抗体）相向扩散，达到平衡时形成沉淀线。

SDS-P***E又叫做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳，其作用具体如下：由于SDS P***E可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度，因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度。

抗体的纯度鉴定选择何种物质作为凝胶电泳支持物

常用1%的琼脂糖作为电泳支持物。琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段，其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低，但它制备容易，分离范围广。普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0.2-20kb，利用脉冲电泳，可分离高达10^7bp的DNA片段。

目前，常用琼脂糖作为电泳支持物，分离蛋白质和同工酶。将琼脂糖电泳与免疫化学相结合，发展成免疫电泳技术，能鉴别其他方法不能鉴别的复杂体系，由于建立了超微量技术，0.1ug蛋白质就可检出。

【答案】：C 抗体纯度的鉴定***用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-P***E）、双向免疫扩散试验、免疫电泳等方法。

琼脂糖凝胶电泳是常用的生物化学实验方法，用于分离和分析DNA、RNA或蛋白质等生物大分子。琼脂糖凝胶电泳的原理是利用凝胶孔径大小的差异来实现生物大分子的分离。

的大小，选择合适的凝胶成分，使之既有适宜的空隙度，又有比较好的机械性质。③在一定浓度范围聚丙烯酰胺对热稳定。凝胶无色透明，易观察，可用检测仪直接测定。④丙烯酰胺是比较纯的化合物，可以精制，减少污染。

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